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Título
La muerte celular inmunogénica como potencial tratamiento alternativo frente a la leishmaniasis
Autor
Director/es
Facultad/Centro
Área de conocimiento
Cita Bibliográfica
Álvarez Bardón, M. (2023). La muerte celular inmunogénica como potencial tratamiento alternativo frente a la leishmaniasis. [Tesis doctoral, Universidad de León]
Fecha
2023-07-15
Resumen
[ES] La leishmaniasis incluye un grupo de enfermedades tropicales desatendidas
causadas por protozoos del género Leishmania. Este parásito intracelular ha desarrollado
la capacidad de sobrevivir en el interior de las células inmunes del hospedador, evitando
así su exposición al sistema inmune. Los tratamientos farmacológicos actuales presentan
numerosos efectos adversos y son proclives a generar resistencias, por lo que urge la
búsqueda de nuevas estrategias terapéuticas. En los últimos años, la muerte celular
inmunogénica (ICD) ha surgido como una terapia prometedora frente a ciertas
enfermedades, entre las que destaca el cáncer. Basándonos en esta hipótesis, hemos
tratado de imitar el microambiente tumoral al microambiente generado por Leishmania en
el interior de las células hospedadoras, con el fin de desarrollar un tratamiento novedoso
que eliminara los parásitos intracelulares de Leishmania mediante la activación del sistema
inmunitario.
La apoptosis es una ruta celular programada dependiente de caspasas que
produce la formación de cuerpos apoptóticos que engloban el contenido celular, sin
provocar una respuesta inmunológica. La necroptosis presenta características intermedias
entre la necrosis y la apoptosis, ya que es una muerte celular programada inmunogénica
que implica la ruptura de la membrana celular, pero es independiente de caspasas.
Basándonos en esto, hemos inducido distintos tipos de ICD en macrófagos murinos
infectados con Leishmania infantum, por irradiación UV o mediante inhibidores de
proteínas involucradas en estos procesos. Nuestros resultados mostraron que la viabilidad
de los macrófagos a los que se les había inducido ICD era mayor en los que se
encontraban infectados con respecto a las células no infectadas. Los patrones moleculares
asociados a daño (DAMPs) generados por macrófagos a los que se les había inducido
ICD se emplearon como estimuladores de bazos sanos para que, tras su co-cultivo con
bazos infectados, generaran una respuesta inmune frente a los amastigotes intracelulares.
Se logró reducir la viabilidad de los amastigotes de los explantes infectados cuando las
vías inducidas en macrófagos murinos eran la apoptosis intrínseca y la extrínseca. Sin
embargo, el proceso necroptótico no generó ninguna respuesta frente a la infección.
El proceso de presentación cruzada ha surgido como un mecanismo para combatir
inmunológicamente tumores y patógenos intracelulares, como virus o parásitos. Sin
embargo, se han descrito diversos mecanismos de evasión de la respuesta inmune por
parte de Leishmania, entre los que destaca la alteración de la ruta de presentación cruzada
antigénica. Con tal fin, se quiso evaluar el efecto de los DAMPs en la activación de las
células dendríticas (DCs) involucradas en el proceso de presentación antigénica y en la
proliferación de células T, mediante experimentos de presentación cruzada. Para ello, se
crearon las cepas L. infantum 2713 HASPB:OVA y L. infantum 2713 mCh-HASPB:OVA, las cuales expresan la proteína OVA anclada a la cara externa de su membrana plasmática. De esta forma, la estimulación de las DCs por parte de los DAMPs procedentes
de células RAW 264.7 inducidas a ICD, junto con la presentación en moléculas MHC-I de
antígenos de Leishmania procedentes de lisados de amastigotes de L. infantum 2713
HASPB:OVA, y su co-cultivo con células T específicas de OVA (el hibridoma B3Z o células
OT-I), proporciona un método de evaluación de la presentación cruzada al cuantificar la
proliferación de células T. Con ello, obtuvimos que los DAMPs generados tras el
tratamiento de las células con radiación UV y compuestos que inhiben proteínas
antiapoptóticas implicadas en la ruta extrínseca de apoptosis eran capaces de promover
un proceso de presentación cruzada antigénica. Tras la realización del fenotipado de
bazos infectados con L. infantum 2713 HASPB:OVA, se comprobó que el parásito es capaz
de infectar las distintas subpoblaciones de DCs y, además, modificar su frecuencia con
respecto a bazos de ratones no infectados.
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Aparece en las colecciones
- Tesis [1353]
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