Evaluación de la histona 3 y dos de sus alteraciones epigenéticas más comunes (h3k27acetyl y h3k27me3) mediante inmunomarcaje en un modelo porcino

Abstract

[ES] Uno de los retos más importantes a los que se enfrenta el sector porcino es la detección de verracos de fertilidad subóptima para la cría. Las técnicas de análisis espermático porcino utilizadas hoy en día presentan limitaciones a la hora de evaluar su idoneidad para la inseminación de cerdas, por lo que nuevas técnicas deben estudiarse para mejorar esta situación. En el presente estudio se llevó a cabo la evaluación de muestras espermáticas procedentes de un grupo de verracos en distintas recogidas a lo largo del año mediante un protocolo de identificación tanto de la H3 total como de dos de sus modificaciones postraduccionales más importantes: su acetilación y trimetilación. Este análisis fue llevado a cabo mediante la técnica de citometría de flujo. La cantidad de histonas presentes en la cromatina espermática es un indicador del nivel de compactación de esta, mientras que la acetilación suele estar relacionada con la activación de la transcripción y la trimetilación con la represión de esta. En base a los resultados obtenidos, se puede observar que el contenido en la H3 y sus variantes se reduce a lo largo del tiempo, lo que podría generar una cromatina más compacta. Por otro lado, los niveles de acetilación también se reducen, mientras que los de trimetilación aumentan. Se trata de unos resultados muy interesantes y prometedores. Sin embargo, todavía es necesario comparar estos datos con los de fertilidad proporcionados por el centro de investigación para poder establecer nuevas conclusiones

[EN] One of the most important challenges faced by the porcine sector is the detection of boars with suboptimal fertility for breeding. The analysis techniques of porcine sperm used today have limitations when evaluating their suitability to inseminate sows, so new techniques must be studied to improve this situation. In the present study, the evaluation of sperm samples from a group of boars collected at different times of the year were evaluated using a protocol to identify both total H3 and two of its most important posttranslational modifications: acetylation and trimethylation. This analysis was carried out by flow cytometry. The amount of histones present in sperm chromatin is an indicator of the level of sperm chromatin compaction, whereas acetylation is usually related to transcription activation and trimethylation to transcription repression. Based on the results obtained, it can be observed that the content in H3 and its variants is reduced over time, generating a more compact chromatin. Moreover, the levels of acetylation also decrease, while those of trimethylation increase. These are very interesting and promising results. However, it is still necessary to compare these data with the fertility data provided by the research center in order to draw new conclusions