El supresor de la activación de células T con dominio variable de inmunoglobulina (VISTA)
es un miembro recientemente descrito de la familia de ligandos inmunorreguladores B7 que
se expresa preferentemente en la superficie de linfocitos T y células presentadoras de
antígenos (APCs). Es una glicoproteína coinhibidora capaz de atenuar la respuesta inmune
mediada por linfocitos T activados cuando interacciona con un receptor que se desconoce.
Esta actividad convierte a VISTA en una diana terapéutica potencial en el tratamiento de
enfermedades autoinmunes, el rechazo de los trasplantes y el desarrollo de inmunoterapias
frente al cáncer. En este trabajo, se han diseñado dos proteínas de fusión recombinantes
constituidas por la región extracelular de VISTA y dos tags destinados a permitir su
detección, un epítopo y el péptido aceptor de biotina AviTag. Para cumplir este objetivo, se
expresó de forma transitoria cada construcción quimérica junto a un vector que codifica para
la biotina ligasa de E. coli (BirA) en células HEK-293T mediante cotransfección celular. Se
confirmó la expresión de ambas proteínas recombinantes biotiniladas mediante detección
directa con estreptavidina-HRPO. El desarrollo de estas herramientas moleculares permitirá
realizar futuros ensayos para aislar, purificar y finalmente identificar el receptor de VISTA
