RT info:eu-repo/semantics/doctoralThesis T1 Evaluación de nuevos adyuvantes en la vacunación frente a la paratuberculosis = Evaluation of new adjuvants in the vaccination against ovine paratuberculosis A1 Reyes Ávila, Luis Ernesto A2 Sanidad Animal K1 Sanidad animal K1 Inmunología veterinaria K1 Patología veterinaria K1 Vacunas K1 Paratuberculosis K1 Ganado ovino AB En la presente tesis doctoral se evalúa la actividad adyuvante del Montanide® ISA 266 y Montanide® IMS 1312 junto a bacilos inactivados de Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis (Map), estudiando la reacción local inducida en el punto de inoculación y la respuesta inmune periférica, comparándolos con el adyuvante empleado en la vacuna comercial Gudair® (aceite mineral en doble emulsión estable). Se desarrollan tres experiencias en las que se vacunan corderos de 30 días de edad, evaluando cada vez la respuesta inmune humoral y celular asociadas a la vacunación, la evolución clínica y las características anatomopatológicas de la reacción local producidas por los diferentes preparados vacunales, y en el último de ellos, la eficacia del producto con mejores resultados en las experiencias anteriores, frente a una infección experimental con Map.En el primer experimento se emplearon 40 corderos de 1 mes de edad, divididos en cuatro grupos de 10 individuos cada uno. Los grupos A, B y C fueron vacunados con la vacuna comercial Gudair®, una vacuna elaborada con el adyuvante Montanide® ISA 266 (50% de aceite mineral, 50% de un aceite metabolizable y un surfactante) y otra con Montanide® IMS 1312 (compuesto exclusivamente por elementos orgánicos), respectivamente. Todos ellos con el mismo número de bacilos y cepa de Map. El cuarto grupo quedó como control. Se estudió la respuesta inmune humoral mediante un test de ELISA y la prueba de inmunodifusión en gel de agar para la detección de anticuerpos específicos frente a Map, y la respuesta mediada por células mediante el test del interferón-γ y la intradermorreacción empleando PPD aviar y PPD bovina. También se estudiaron las características anatomopatológicas del nódulo vacunal y del nódulo linfático preescapular en sacrificios a los 15, 30 y 75 días post-vacunación y se determinó el porcentaje de linfocitos CD4+, CD8+, TCR-γδ, CD45R y B, en sangre y en los nódulos linfáticos preescapular y mesentérico yeyunal caudal mediante citometría de flujo. En el grupo B, vacunado con Montanide® ISA 266, la respuesta inmune celular fue más intensa, coincidiendo con una mejor conformación de los nódulos vacunales, siendo estos de tamaño medio, redondeados, móviles, fibrosos y con una distribución más homogénea del antígeno. En el grupo A los nódulos eran más grandes, irregulares, infiltrantes y con un gran centro necrótico que en algunos casos fistulizó al exterior. La respuesta humoral en este caso fue superior a la observada en el resto de los grupos. No se apreciaron variaciones significativas en las poblaciones de linfocitos sanguíneos, mientras que si fue evidente el incremento de células CD45R y B en el ganglio preescapular de animales vacunados, especialmente de los grupos A y B YR 2017 FD 2017-02-23 LK http://hdl.handle.net/10612/5920 UL http://hdl.handle.net/10612/5920 NO 318 p. DS BULERIA. Repositorio Institucional de la Universidad de León RD 21-may-2024